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奥林巴斯激光扫描显微镜-FV3000
  • 货号:FV3000
  • 名称:FV3000 Confocal Laser Scanning Microscope
  • 描述:奥林巴斯激光扫描显微镜-FV3000
  • 浏览量:414
  • 产地品牌:
产品描述

FLUOVIEW FV3000系列的设计目的是迎接现代科学中所提出的艰巨的挑战。FV3000系列产品具有完成活细胞和组织成像所需的高灵敏度和高速度,从而可以为细胞、组织和较小的生物体完成2D到6D(x,y,z,t,λ,p)的从宏观到微观的成像操作。FV3000系列产品有一个直观的且可以调整的用户界面,可支持从图像采集到图像处理和分析的整个工作流程。在研发FV3000产品时,我们特别注意要满足细胞生物学、肿瘤研究以及干细胞研究的需要。现在FV3000系列又新添了两款正置配置,还可以随时满足神经科学、电生理学和发育生物学的需要。

激光扫描共聚焦显微镜

特点


FV3000系列扫描单元


常规扫描振镜和常规/共振混合式扫描单元

用户可以选择两种不同类型的扫描单元:仅配常规扫描振镜的FV3000,或者配有常规/共振混合式扫描的FV3000RS。 混合式扫描单元配有用于高精度扫描的常规扫描振镜,以及非常适合高速成像的常规/共振扫描振镜。常规扫描振镜可让奥林巴斯超高分辨率技术(FV-OSR)获得低至120nm的分辨率以及高信噪比,并且具有精确的龙卷风和多点刺激以及100ms切换速度。 常规扫描振镜能够在2X变焦条件下每秒获取16帧图像。 共振扫描振镜的扫描速度范围为从512 x 512每秒30帧,到512 x 32每秒438帧。

不存在速度与视场之间的妥协

许多高速扫描方法存在对视场的限制,因此限制了其在多细胞大面积检测方面的使用。 FV3000系列产品的共振扫描振镜甚至在每秒30帧的视频速度情况下亦可保持全1X视场。甚至在每秒438帧的速度下通过裁剪Y轴获得更高速度。



大多数共振扫描振镜只能在速度与视场之间做出妥协。 经过优化的FLUOVIEW系统可确保视场与信号强度之间无需妥协,因此可在细胞和组织的大背景下观察动态样本(如钙成像)。

上图显示为其他系统所要求的放大倍率示例。



 




小鼠血管内血小板结合形成血栓。 利用配有2通道 GaAsP光电倍增管的共振扫描单元以全帧每秒30帧获得的图像。 
图像数据由 Takuya Hiratsuka博士, Michiyuki Matsuda博士提供,京都大学生命科学研究生院。




甲醇固定的A431细胞,使用Abcam ERK1抗体 + ERK2抗体 (Alexa Fluor 488) ab208564,以及α微管蛋白抗体(Alexa Fluor 594) ab195889和DAPI标识。 样本由Abcam提供。



活细胞成像的优化

与标准常规振镜扫描通过避免荧光激发转化为产生活性氧的三重态方法相比,共振扫描极大地降低了光漂白和光毒性。 这些特点让活细胞实验更加稳健可靠。FV3000系列产品具备全面的高低范围激光强度控制功能,系统可在样本上使用最低规定量的激光功率。 选配激光功率监视器可在多日长时间延时成像过程中确保连续一致的激光功率。



TruSpectral检测功能介绍

灵敏度与精确度兼具的全光谱系统


FV3000系列产品采用了奥林巴斯的TruSpectral检测概念。 基于专利* 体相位全息 (VPH) 透射光栅和控制光线的可调式狭缝,FV3000和FV3000RS的光谱检测具有较高效率,可让使用者将每个单独通道的探测波长选定为1nm。 

* US8530824B/JP5541972B/EP2395380A


采用GaAsP光电倍增管的高灵敏度光谱检测器(HSD)提升量子效率



高灵敏度光谱检测器(HSD)能够观察由于过于不明显而无法使用传统型设备观察的样本。 GaAsP光电倍增管具有最大量子效率45%的2个通道,Peltier制冷可让高S/N比例图像在极低激发光照射下背景噪声降低20



高效TruSpectral检测系统

FV3000系列产品将全系统传输效率提升到新的层面,让每个系统均具有全面光谱,提高总体灵敏度,并提高信噪比,实现多色彩共焦成像的改进提升。





采用16通道拆分的多通道TruSpectral检测

TruSpectral高效率的设计和软件可让光谱检测器在多通道波长模式下以阵列模式进行实时光谱拆分和后处理光谱拆分。 多通道模式有助于在活细胞实验过程中确保一致的光谱拆分,以及在图像获取过程中分割复杂的荧光。 利用阵列4个不同通道的4种不同动态范围,不论明亮还是微弱的光谱信号均可通过调整每个检测器的灵敏度进行独立分割。







简单直观的软件

简单直观的工作流程


可定制、可保存的布局能够轻松按工作流程和实验需求实现从简单到复杂的界面定制。







布局

从选择操作特定工具的偏好布局开始,实现从简单到复杂的图像获取。

获取条件

重新加载上次实验的完美配置,获得前后一致性。

获取

通过活动比例、 强度调节显示、量化兴趣区(ROI)图形绘制或光谱拆分显示实现从简单到复杂的图像获取,并提供数据备份功能提高安全性。

查看器

回顾已经生成的数据。 生成3D和4D图像和动画,实现深层次的探索和共享。

分析

利用在线和离线处理从图像中提取数据。 分析工具包括奥林巴斯超高分辨率技术 (FV-OSR)和具有诸如反卷积、筛选、计数和测量以及一键批量处理功能的强大cellSens软件。


TruSpectral探测的现场光谱拆分和实时处理


TruSpectral探测能力外加多通道模式意味着在图像获取过程中就可实现现场光谱拆分,实现复杂叠加光谱的实时处理。





精确的顺序管理器和实时获取

轻松处置复杂方案,并且实时控制可让微秒精度扫描在多日延时过程中获得毫秒级精度。

多区域延时、微孔板、和拼接的载物台控制

      

微孔板成像对于诸多应用非常重要,孔导航器可为各类细胞培养器皿和定制板提供复杂、直观的控制。 多区域延时和拼接能够获得稳健精确的延时数据。


硬盘记录

显微镜在出厂时即配有硬盘驱动器(HDD)记录功能。 所捕捉的图像可自动保存在硬盘驱动器(HDD)内。 诸如从长期延时成像获得的大量数据均可保存。

利用cellSens实现强大的一键式批量分析


仅仅是成像还不够; 利用集成cellSens软件的计数和测量分析功能,FV3000系列产品能够进行图像反卷积优化,并使用一键批量处理功能对各种形态学测量进行分析。


表达Fucci2 NMuMG细胞系的球状团块图像。图像提供方:Atsushi Miyawaki,日本理化学研究所脑科学研究中心细胞动力学实验室。





比例成像和 强度调节显示(IMD)


FV3000RS在软件中包含 强度调节显示(IMD)功能,可在标准及高速图像获取过程中显示量化荧光比例的变化。当纯比例显示无法在背景区获得良好的对比时,该功能对于钙和FRET成像特别有用。

tsGFP1-mito揭示了HeLa细胞中线粒体生热作用的不均匀性。CCCP 37 °C处理前后tsGFP1-mito表达细胞中的比例图像(ex 405 nm/ ex 488 nm)。 比例尺显示10 μm (全图) 和 3 μm (插图)。图像提供方:Shigeki Kiyonaka博士,Yasuo Mori博士,京都大学合成化学系和生物化学系分子生物学研究室。







图像数据提供方:Yusuke Nino和Atsushi Miyawaki,日本理化学研究所脑科学研究中心细胞动力学实验室。












循环平均处理


为避免光毒性以较低激光功率进行高速扫描往往会降低信噪比。 通过采用循环平均后处理方式,使用者能够在确保时间比例并保持原始数据的同时获得调整高速延时图像的灵活性。


(左) 以较低激光功率获取的原始每秒30帧数据 (0.05 %,488 nm). (右) 对以较低激光功率获取的每秒30帧数据的循环平均处理(10帧) 。





反卷积


选配约束迭代 (CI)反卷积解决方案采用先进的CI算法实现更高分辨率、相差、以及动态范围,并且达到业内领先的速度。这种专有后处理工具足以应用于CCD和共焦成像,且提升了区分成像目标的能力。


细胞谱系:人宫颈癌细胞谱系HeLa细胞的免疫染色:Hec1染色(绿色,Alexa Fluor-488),α微管蛋白染色 (红色,Alexa Fluor-568),DAPI 染色(蓝色)由人宫颈癌获得的有丝分裂HeLa细胞。有丝分裂纺锤体和着丝粒分别采用α微管蛋白抗体 (红色) 和Hec1抗体 (绿色)染色。 染色体通过着丝粒,在染色体着丝粒区装配的蛋白结构与构成有丝分裂纺锤体的微管进行交互作用。

图像提供方:Masanori Ikeda和Kozo Tanaka, 东北大学,发育、衰老与癌症学院,分子肿瘤学系。



奥林巴斯超高分辨率 (FV-OSR) 

奥林巴斯应用范围宽广的超高分辨率解决方案对荧光探针没有特殊要求,可用于各种样本。 作为共定位分析的理想选择,FV-OSR能够以大约120nm的分辨率顺序或同步获取4个荧光信号*,几乎达到常规共焦显微技术分辨率的2倍。 该系统使用方便,用户培训要求极低,并可添加到任何共焦系统内,这让FV-OSR成为实现超高分辨率真正可行的方法。*取决于物镜倍率、数值孔径、激发和发射波长、以及实验条件。 
标记 GFP (Alexa Fluor 488,神经元) 和SV2 (Alexa Fluor 565,红色)的二次抗体。 样本由 Ed Boyden博士和 Fei Chen博士提供,麻省理工学院。








宏观到微观的观察


找到样本中的感兴趣区域并非易事。 FV3000系列产品的共聚焦光学设计可支持宏观到微观成像,因此使用者能够快速从1.25物镜的低倍率观察切换到最大150X物镜的高倍率详细观察。 使用者在宏观或微观层面利用图像拼接可生成在背景内显示样本的总览图像。


成年YFP-H 小鼠大脑冠状面(30 μm厚)的拼接图像,使用20X 物镜(UPLSAPO20X)获取. 

图像提供方: Takako Kogure和Atsushi Miyawaki,日本理化学研究所脑科学研究中心细胞动力学实验室。




优良的光学器件和刚性机架

适用于活细胞成像的硅油浸入式物镜



奥林巴斯可提供四种能够获得优良活细胞成像效果的高数值孔径硅油浸入式物镜。 硅油的折射率 (ne ≈ 1.40) 与活组织的折射率 (ne ≈ 1.38)接近,这让活组织深部高分辨率观察能够把因折射率不匹配造成的球面像差降到最低。 硅油不会干燥或硬化,因此无需加油,这让其成为扩展延时观察的理想选择。


UPLSAPO30XS: 适用于更宽视野和更大深度
倍率: 30X,NA: 1.05 (硅油浸入式),W.D.: 0.8 mm, 
盖玻片厚度: 0.13 - 0.19 mm,工作温度: 23 - 37 °C

UPLSAPO40XS : 全面的倍率范围
倍率: 40X,NA: 1.25 (硅油浸入式),W.D.: 0.3 mm, 
盖玻片厚度: 0.13 - 0.19 mm,工作温度: 23 - 37 °C 

UPLSAPO60XS2:适用于优良分辨率的3D观察
倍率: 60X,NA: 1.30 (硅油浸入式),W.D.: 0.3 mm, 
盖玻片厚度: 0.15 - 0.19 mm,工作温度: 23 - 37 °C 

UPLSAPO100XS: 适用于在精确界定区域内进行更大深度的观察
倍率: 100X,NA: 1.35 (硅油浸入式),W.D.: 0.2 mm, 
盖玻片厚度: 0.13 - 0.19 mm,工作温度: 23 - 37 °C


折射率对于深部组织观察十分重要




在深层组织观察中,图像质量取决于确保样本与浸液的折射率尽可能彼此接近。在采用硅油浸入式物镜时,样本与硅油的折射率差别极小。 因此能够在深层组织上以较高分辨率获得明亮的荧光图像。



PLAPON60XOSC2: 提高共定位分析的可靠性

这种油浸入式物镜将405 - 650 nm光谱范围的侧向与轴向色差降低到最低限度。 共定位图像能够得到可靠获取,且以优良定位精度对图像进行测量。 该物镜还可通过最大850nm的近红外光谱对色差进行补偿,这让其成为量化成像的理想选择。


低色差物镜 

倍率: 60X 
NA: 1.4 (油浸入式) 
W.D.: 0.12 mm 
色差补偿范围: 405 - 650 nm 
                                           每个物镜均提供光学数据。


PLAPON60XOSC2和UPLSAPO60XO的性能对比





利用IX83满足稳定性要求

安装在物镜转盘附近的Z-传动导向件将较高的热硬度与环绕式结构的稳定性结合一体,大幅度降低了热和振动的影响,改善了延时成像的品质。








明亮条件下的高对比度


umbra装置专为荧光观察而特别设计。 其能够有效阻挡室内光线,提高荧光对比,并可在明亮条件下获得清晰的荧光观察效果。




模块化


扫描器


混合式扫描单元(共振/³£¹æ振镜)



该混合式扫描器将常规扫描振镜与共振扫描结合在一起,能够以全视场每秒30帧速度以及512 x 32每秒最大438帧的速度实现高速成像。 顺序管理器让同一实验内共振扫描和常规振镜成像之间的自动切换更加简单。



常规振镜扫描单元

仅配有常规振镜的扫描器能够以 512 x 512实现从每秒1帧到每秒16帧的精确扫描。 高速多点刺激或检测实验能够以超过100 Hz频率在多个细胞之间进行,并且以高达500 kHz的频率输出数据。


光谱检测器

采用 TruSpectral技术的高灵敏度光谱检测器 (GaAsP光电倍增管)


该2通道高灵敏度光谱检测器(HSD) 采用与光谱检测器(SD)相同的体相位全息光栅(VPH)技术,使用 Peltier制冷GaAsP 光电倍增管,量子效率可高达45 % 且可检测范围达到750 nm。 该设备可结合 2通道光谱检测器 (SD)使用,以获得灵活的动态范围,也可配合第二台2通道高灵敏度光谱检测器(HSD) 使用,获得强大的4通道灵敏度。


采用 TruSpectral技术的光谱检测器 (多碱光电倍增管)


该2通道光谱检测器采用高效率的VPH透射光栅,检测波长范围400 - 800 nm,1 - 100 nm 带宽可调式狭缝。这种多碱光电倍增管(PMT)能够实现最大800 nm的宽广动态范围。



激光耦合器

主激光耦合器


主激光耦合器是激光系统的核心部件。 四束标准激光,并可添加第五束激光,或留出一个开放端口用于通过副激光耦合器添加额外三束二极管激光器。

 



副激光耦合器

任何时候均可为该选配耦合器添加最多3个二极管激光器,结合主激光耦合器达到最大7根激光线路。





照明单元


传统型照明模块设计用于长持续时间的延时实验。 由于光可通过光纤传输系统导入,因此热量不会传送到显微镜。

光源/U-HGLGPS


经过预对中的荧光照明光源无需调整,并且平均使用寿命可达2000小时。


 



透射光检测器/FV31-LETD


该装置采用外置透射光光电倍增管检测器和LED传统型照明,激光扫描和传统透射光Nomarski DIC观察均可使用。 使用者可进行同步多通道共聚焦荧光成像和透射光DIC获取。




系统部件


从以下选配方案选择可现场升级的激光自动对焦、快速精确的电动载物台控制、模拟输入/输出和TTL同步的、以及方便的防震平台。

Z轴漂移补偿系统/IX3-ZDC2

IX3-ZDC2采用光毒性极小的红外光(1级激光)探测样本平面位置。 单次自动对焦 (AF)模式可根据需要对较深样本设定多个焦点位置,实现多位置实验的高效 Z-stack获取。 连续AF模式可确保所感兴趣的观察面精确位于焦点上,避免了因温度变化或添加试剂导致的焦点漂移,这让其成为对焦要求更为严苛测量的理想选择。另外,光学补偿的增加让针对塑料器皿或使用干燥物镜的连续自动对焦成为可能。 IX3-ZDC2还可兼容硅油浸入式物镜使用(以AF模式)。







IX3/IX3-SSU的超声波载物台


超声波载物台具有改善精度的低热漂移特性,并能够使用软件和触摸屏进行控制,方便获得快速、可靠的多区域成像。


 

 

IO接口盒/FV30-ANALOG


该设备可通过模拟输入支持电生理实验,并支持TTL I/O。 接口盒可将电压转换为能够以与荧光图像相同方式处理的图像。 


 


简易防震台/FV31-AVP


这种简易防震台与FV3000的占用空间相适应,是无需全防震工作台应用的紧凑空间解决方案。






全球支持

安装通常仅需一天时间,快速实现系统的启动和运行。 我们利用全球知识库为产品提供服务支持。可帮助您选择能够根据应用情况优化系统的功能特性。 共聚焦系统是资产投资,确保系统以最佳性能运行非常重要。 我们的认证服务团队可快速安排调整规程和系统诊断,让您的系统保持在最佳状态,并排查任何问题。


详细情况可以联系我们公司,电话:010-67968866,欢迎来电咨询。

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